這次講解堿裂解法，從大腸桿菌中抽提質(zhì)粒的基本原理。

我們將搖菌得到的混合物離心，去除培養(yǎng)基，就可以獲得大腸桿菌，加入溶液1重懸。溶液1含緩沖成分，和抑制Dnase的EDTA。加入溶液2，含NaOH和SDS。在強堿環(huán)境下，細菌的細胞壁和細胞膜被破壞，釋放出基因組DNA和質(zhì)粒DNA。此時基因組DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞，發(fā)生變性。質(zhì)粒DNA也會發(fā)生變性，但兩條互補鏈仍會互相盤繞，并緊密的結(jié)合在一起。

當加入溶液3（含醋酸鉀溶液）使pH恢復中性時，共價閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA復性快，而線性的染色體DNA復性緩慢，細菌蛋白質(zhì)、破裂的細胞壁和變性的染色體DNA會相互纏繞成大型復合物，被十二烷基硫酸鹽包蓋，從溶液中有效地沉淀下來。經(jīng)過離心除去變性劑后，就可以從上清中回收復性的質(zhì)粒DNA。

質(zhì)粒抽提試劑盒中，通常還有 DNA吸附柱，將質(zhì)粒DNA吸附，其他的雜質(zhì)被洗去。最后用洗脫液，將質(zhì)粒DNA洗脫下來。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術服務，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)